HPLC漏气

                                                                      HPLC漏气

                                                          上海连桥生物科技有限公司

漏气

漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部的气体进入液相色谱仪的流路内部形成了气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。

1.过滤头

抽液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气（需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率），如果已经脱了气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。处理方法比较简单，拧下过滤头在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去即可。

2.透明流路管

指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡，而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知，以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因（我们做液相一定要有“微渗"的概念）。如果长时间不用，这一段管路的液体会*干掉，而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出的。

这种情况对于输送泵很危险，因为，泵从设计来说是输送液体而不是气体，内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用，如果活塞杆上还残存了一些缓冲盐，则极易拉伤，造成不可逆转的影响。

对于这种情况，要突出“预防为主"，如，液相色谱使用人员要相对固定和稳定，工作中合理搭配资源，每台机一周至少作一次实验，如长期不用起码每周要冲流动相2 小时。养成良好的工作习惯很重要。如果不慎出现了这种问题怎么办？我的建议是用外力使管路中充满液体。具体如下：

(1)找到流路管进入输送泵的接头。

(2)拧下来。

(3)用一干净的洗耳球的尖duan对准管路的平整切口。

(4)吸液体，看液面从流动相瓶里上升，至离洗耳球5 厘米左右时停止该动作。

(5)快速把接头拧回输送泵上（这个过程可能会有少许流动相外泄，这是正常现象）。

(6)开机，打开排液阀门，启动输送泵。

(7)等排液管中流出的溶液没有气泡时，再关闭排液阀，仪器正常工作。

3.输送泵和柱子

这些部分进了气泡一般不怕，冲掉就行。

4.检测器

应该说，整个流路中只要有一个气泡都会在检测器上得到强烈的信号反映，检测器内部的气泡一般都能被冲走，但也有很难冲掉的残留气泡的情况。

如果检测器里有残留气泡，会有特征明显的表现形式，就是在走基线时会时不时间隔出现直上直下信号很大的信号峰。这时先看普通流量能否冲走，如果冲不走，那wei一的办法就是拆柱，把检测器直接连到输送泵的出口，加大几倍流量冲洗，则肯定能冲走气泡。

                                                                                                                                                 本篇转载至实验之家