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不知道如何计算菲罗门色谱柱的死体积?学会这个公式你就明白了

更新更新时间:2021-04-23

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    菲罗门色谱柱死体积狭义上指的是色谱柱中未被固定相占据的空隙体积,即色谱柱内流动相的体积。广义上的死体积是指进样位置(进样口)到检测位置(检测器流通池)这一段的体积(PS:除去色谱柱中填料体积),一旦色谱柱连接,这段体积(图示橙色管路)是不变的(死的)。

    HPLC中菲罗门色谱柱死体积该如何计算:

    死体积(deadvolume,V0)——由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分:进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙(被流动相占据,Vm)、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程,其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰扩展,这3部分体积应尽量减小。

    死时间(deadtime,t0)——不保留组分的保留时间。即流动相(溶剂)通过色谱柱的时间。

    测量系统死体积通常需要通过实验进行测量,常用方法是通过进一针和色谱柱固定相没有任何作用的特殊溶液(方法中会有规定,例如:尿嘧啶,少量NaNO3或甲醇溶于流动相得到的溶液,也有直接用100%色谱纯甲醇进样的情形)时,就会得到一个色谱峰,由此峰可以测得死时间(t0),这就是t0的实测结果。

    然后通过计算得到系统死体积:

    死体积(V0)=死时间t0×流动相的流速F。

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