热电色谱柱在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
含有样品的流动相液体通过一固定于柱子或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面;当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
热电色谱柱的柱子接反了怎么办?如果柱子质量比较好,理论上没有影响,如果柱子质量不好,可能会导致分离度下降、柱效降低。一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
一般液相色谱柱是有方向的,通常情况下只能按照其规定流向通过流动相,尤其当色谱柱填充质量不高的时候。比如实验室自制色谱柱、使用压力高的色谱柱等。这类色谱柱的进口端一般会有一定的凹陷,如果反过来使用,会导致色谱柱填料的塌陷,产生柱效降低等后果。
但是如果制备良好的色谱柱,比如热电色谱柱,在进了比较脏的样品后,可以反冲洗来冲出杂质。